فصل سوم مواد، تجهیزات و روش تحقیق ۵۲
۳- ۱- استخراج کوتین ۵۵
۳- ۲- نمونه برداری ۵۵
۳- ۳- غربالگری و جداسازی گونه­ های تولیدکننده آنزیم کوتیناز ۵۵
۳- ۴- تهیه slant از سویه­های جدا شده ۵۷
۳- ۵- نگهداری طولانی مدت سویه­ها ۵۷
۳- ۶- تهیه گلیسرول ۵۸
۳- ۷- تهیه محیط کشتLB 58
۳- ۸- Assay آنزیمی ۵۸
۳- ۹- Assay ویژه آنزیمی ۶۰
۳- ۱۰- استخراج DNA 60
۳- ۱۰- ۱- استخراج DNA به روش جوشاندن ۶۰
۳- ۱۰- ۲- استخراج DNA به رو ش CTAB 61
۳- ۱۰- ۳- روش استخراج DNA با کیت ۶۴
۳- ۱۱- اندازه ­گیری کیفیت و غلظت DNA 65
۳- ۱۲- رنگ آمیزی با اتیدیوم برماید ۶۹
۳- ۱۳- واکنش زنجیره ای پلیمراز Polymerase Chain Reaction 70
۳- ۱۴- راه اندازی واکنش PCR 74
۳- ۱۵- برنامهPCRبرای نشانگرRAPD 76

۳- ۱۶- توالی­یابی سویه­های تولیدکننده آنزیم کوتیناز با بهره گرفتن از ۱۶S rDNA 77
۳- ۱۷- الکتروفورز محصولات واکنش PCR 78
فصل چهارم ۸۰
۴- ۱- بررسی میزان کوتین در میوه­های مختلف ۸۱
۴- ۲- جداسازی سویه­ها ۸۷
۴- ۳- بررسی فعالیت آنزیم کوتیناز در نمونه­ها ۸۷
۴- ۴- نتایج بررسی کیفیت DNA بعد از استخراج ۸۸
۴- ۵- تجزیه و تحلیل تنوع ژنتیکی ۶ سویه بر اساس نشانگر مولکولی RAPD 89
۴- ۶- نتایج حاصل از تجزیه خوشه­ای بر اساس نشانگر RAPD 89
۴- ۷- تجزیه به مختصات اصلی ۹۰
۴- ۸- نتایج تجزیه باندهای حاصل از ۸ پرایمر RAPD 92
۴- ۹- ضریب همبستگی کوفنتیک ۹۳
۴- ۱۰- شناسایی و توالی یابی سویه­ها با بهره گرفتن از ۱۶S rDNA 93
فصل پنجم ۹۵
۵- ۱- استخراج کوتین ۹۶
۵- ۲- سنجش فعالیت آنزیمی کوتیناز ۹۷
۵- ۳- استخراج DNA 98
۵- ۴- تنوع ژنتیکی با بهره گرفتن از نشانگر RAPD 98
پیشنهادات ۱۰۰
۶- ۱- پیشنهادات ۱۰۱
فهرست جدول‌ها
عنوان صفحه
جدول ‏۲‑۱ مطالعه ساختار- عملکرد کوتیناز به کمک تکنی­کهای مختلف ۲۴
جدول ‏۲‑۲ فعالیت هیدرولازی کوتیناز نسبت به تنوع گستردهای از سوبستراها ۲۹
جدول ‏۲‑۳ روش­های آماده ­سازی کوتیناز ۳۰
جدول ‏۳‑۱ مواد مورد استفاده در پایان نامه ۵۳
جدول ‏۳‑۲ مشخصات کامل مواد شیمیایی مورد نیاز در عملیات استخراج DNA 61
جدول ‏۳‑۳ مواد مورد استفاده برای تهیه بافر TBE(10X) 68
جدول ‏۳‑۴ مشخصات پرایمرهای RAPD 73