۱۰
پپتون۲%
۲۰
دکستروز( گلوکز)۲%
۲۰
آدنین همی سولفات۰٫۰۰۴%
۴۰ میلی گرم
آگار( برای محیط جامد)
( اینجا فقط تکه ای از متن فایل پایان نامه درج شده است. برای خرید متن کامل پایان نامه با فرمت ورد می توانید به سایت feko.ir مراجعه نمایید و کلمه کلیدی مورد نظرتان را جستجو نمایید. )
۲۰
شکل ۱- ۱۰ محیط کشت YPAD (www.ookaboo.com)
۱-۵-۷-۳ محیط کشت DM
محیط کشت معدنی تعریف شده DM[39] برای رشد مخمر در شرایط هوازی و محدود از نظر اکسیژن استفاده شد (Verduyn et al, 1992). این محیط تقریباً شامل تمام اجزاء محیط کشت [۴۰]YNB بوده اما برخی از ترکیبات در غلظت بالاتری وجود دارند. محیط کشت DM بطور معمول برای بدست آوردن داده های فیزیولوژیکی کمی مخمر، همچنین برای بررسی محدودیت در میزان غلظت ویتامینها و عناصر کمیاب رشد، طراحی شده است (Verduyn et al, 1992). کلرید سدیم[۴۱]، ریبوفلاوین[۴۲] و فولیک اسید[۴۳] موجود در این محیط برای رشد مخمر ساکارومایسس ضروری نیستند. در حالیکه کبالت رشد این مخمر را پشتیبانی می کند. EDTA [۴۴]ی موجود در آن به نظر میرسد که برای حل کردن خوب غلظت عناصر کمیاب استفاده می شود (Verduyn et al, 1992) (شکل ۱-۱۱).
شکل ۱- ۱۱ محیط کشت DM ()
۱-۵-۷-۴ محیط کشت YPG
محتویات محیط کشت YPG[45] و مقدار مورد نیاز برای تهیه ی یک لیتر از آن شامل: عصارهی مخمر ۱% (۱۰ گرم)، پپتون ۲%(۲ گرم) و گلیسرول ۳%v/v (30 میلی لیتر) میباشد محیط کشت YPG دارای گلیسرول به عنوان منبع غیر کربنی میباشد. Aoki و همکارانش برای اولین بار از محیط کشت حاوی گلیسرول برای تولید زیست تودهی مخمری استفاده کردند (Aoki et al, 2002) (شکل ۱-۱۲).
شکل ۱- ۱۲ محیط کشت YPG ()
۱-۵-۷-۵ محیط کشت YPAC
در مواردی که لازم است سلول مخمر دیپلوئید هاگآور شود، در محیط کشت دارای کمبود نیتروژن، از استات[۴۶] به عنوان منبع کربن برای پیشرفت تنفس استفاده شده است. یک فرمول کلی برای این محیط کشت، ۱% استات پتاسیم، ۱% عصاره ی مخمر و ۰٫۰۵% دکستروز میباشد و اسپورزایی سلول دیپلوئید می تواند در محیط مایع یا بر روی پلیت انجام شود (www.springer.com).
۱-۶ بخش ششم: مسیرهای متابولیسم مخمر
متابولیسم مواد مغذی به جذب بیوشیمیایی (در مسیرهای آنابولیک) و کاتابولیسم (در مسیرهای کاتابولیکی) توسط سلول اشاره دارد. همانند سایر موجودات در مخمر نیز این فرایندها توسط واکنشهای متقابل آنزیمی و تنظیمات مسیرهای فوق با جزئیات بیشتری مورد مطالعه قرار گرفته است.
۱-۶-۱ مسیرهای آنابولیک
این مسیرها شامل: فرآیندهای رداکتیو یا کاهشی[۴۷] که منجر به تولید مواد سلولی جدید می شود در حالیکه مسیرهای کاتابولیک فرآیندهای اکسیداتیو که سبب انتقال الکترون از سوبسترا یا مواد حد واسط شده و منجر به تولید انرژی می شود را شامل میگردد. این فرآیندها از NADP و NAD بعنوان کوفاکتور استفاده می کنند. مخمرها میکروارگانیسمهایی هستند که تنوعی از متابولیسم را در خصوص اینکه چگونه انرژی را از سوبستراهای آلی تولید می کنند را دارا هستند. اکنون بخوبی ثابت شده است که مخمرها از قند بعنوان منبع اصلی کربن و انرژی استفاده می کنند اما مخمرهایی نیز وجود دارند که میتوانند از منابع کربن نامتعارف بهره گیرند. با توجه به متابولیسم نیتروژن اغلب مخمرها قادرند از منابع سادهی جذب نیتروژن برای بیوسنتز اسیدهای آمینه و پروتئینها استفاده کنند. جدول۱-۳ مواد غذایی مورد استفادهی مخمر را نشان میدهد. جنبه های متابولیسم فسفر و سولفور و همچنین جنبه های متابولیسم سایر ترکیبات معدنی بصورت جزئی بیشتر در مخمر Saccharomyces cerevisiae مورد مطالعه قرار گرفته است (جدول ۱-۳).
جدول۱-۳ مواد مورد نیاز برای رشد مخمر.
محصولات
آنزیم ها
مواد حد واسط
سوبسترا